Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Orta Doğu Teknik Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 1995
Tezin Dili: İngilizce
Öğrenci: Mehrzad Mahmoudian
Eş Danışman: Hüseyin Öktem, HÜSEYİN AVNİ ÖKTEM
Özet:oz TÜTÜNDE AGROBACTERIUM İLE GEN TRANSFERİ Mahmoudian, Mehrzad Yüksek Lisans, Biyoteknoloji Bölümü Tez Yöneticisi: Doç. Dr. Hüseyin Avni Öktem Ortak Tez Yöneticisi: Prof. Dr. Meral Yücel Ocak 1995, 88 sayfa Bu çalışma, Samsun çeşidi tütün bitkilerinde Agrobacterium yoluyla gen transferini içermektedir. Transfer edilen genler, kanamisine direnç sağlayan neomisin fosfotransferaz-II ve genelde raportör gen olarak kullanılan p-glukuronidaz (GUS) enziminin sentezinden sorumlu DNA dizileridir. Gen transferi, pBI121 binary vektörü taşıyan, Agrobacterium tumefaciens LBA4404 susunun kullanımıyla ve "yaprak diski transformasyonu" metoduyla gerçekleştirilmiştir. Binary vektörler, LBA4404 suşlannın içine "tri-parentel mating" olarak bilinen bir yöntemle aktarılmışlardır. Gen tiansferinin başarısı transforme edilen yaprak disMerinin kanamisine direnci ve GUS aMvitelerinin tayini ile saptanmıştır.Yaprak disMerinin öldürücü dozda kanamisin içeren Murashige- Skoog (MSB) büyüme ortamlarındaki kallus oluşumlarına dayanarak saptanan transformasyon yüzdesi %80 üzerindedir. Transforme edilen disklerden elde edilen gövdelerin, %90'dan fazlası kanamisin içeren MSC seçici ortamlarında kök oluştnrabilmiştir. Gelişen bitkiler toprağa alınmış ve normal büyüme göstermişlerdir. Kendi kendine döllenmiş Fo transgenik bitkilerden elde edilen tohumlar kanamisin varlığında çimlenebilmekte ve GUS enzimini ifade edebilmektedirler, bu da aktarılan genlerin Fİ generasiyonunda kalıtımım ve fonksiyonel ifadelerini göstermektedir. Bahsedilen teknikler uygulanılarak aktarılan genlerin fonksiyonel olarak ifade edildiği birçok transgenik bitkiler elde edümiştir. Elde edilen değişik sonuçlar, aktarılması planlanan genlerin transgenik bitkilere ve Fİ generasiyonuna transfer olduğunu, bitki genomuna sabit olarak yerleştiğini ve ifade edildiklerini göstermektedir. Anahtar Kelimeler: Tütün, Gen Transferi, Agrobacterium, Neomisin Fosfotransferaz, GUS vı