Response surface optimization of Bacillus thuringiensis israelensis fermentation


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Orta Doğu Teknik Üniversitesi, Fen Edebiyat Fakültesi, Biyolojik Bilimler Bölümü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2003

Öğrenci: ZEYNEP TOKCAER

Danışman: GÜLAY ÖZCENGİZ

Özet:

Günümüzde, pest populasyonunun böcek patojenleri kullanılarak kontrolü, aynı amaçla kimyasal pestisitlerin uygulamasına oldukça çekici bir alternatif oluşturmaktadır. Kimyasalların çevreye verdikleri zarar, pestlerin direnç geliştirmesi ve sadece hedeflenen organizmanın zarar görmeyip diğer canlıların da vi etkilenmesi göz önüne alındığında, biyolojik mücadele en uygun çözümdür ve Bacillus thuringiensis (Bt) alttürleri tarım, ormancılık ve sivrisinek kontrolünde en çok kullanılan biyoinsektisitler olmuşlardır. Bt türlerini diğer Bacillus türlerinden ayıran en önemli özellik, delta-endotoksin adı verilen protoksinler (kristal protein) sentezlemeleridir. Bu çalışmada, Bt alttür israelensis HD500 tarafından Cry4Ba ve Cry11Aa toksin proteinlerinin yüksek seviyede üretimi için kesikli fermentasyon tepki yüzey optimizasyonu ile incelenmiştir. Besiyeri bileşenlerinin birbiri ile olan etkileşimi ve kültivasyon koşulları toksin proteinlerinin sentezini etkilediğinden, daha önce rapor edilmiş en önemli parametrelerin optimal değerleri sıfır noktası kabul edilerek ([Mn], 10-6 M; [K2HPO4], 50 mM; C:N oranı, 20:1 ve sıcaklık, 30°C) bir deney çizelgesi hazırlanmıştır. Bu çizelgedeki değişkenlerin değişik seviyelerdeki kombinasyonları 30 ayrı kesikli kültürde çalışıldığında, sıcaklık 28.3°C, [Mn]: 3.3x10-7M, C:N oranı: 22.2 ve [K2HPO4]: 66.1mM, Cry4Ba ve Cry11Aa toksin proteinleri için en iyi verimi sağlayan değerler olarak bulunmuştur.