Activity analysis of immobilized tyrosinase enzyme in the presence of different inhibitors


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Orta Doğu Teknik Üniversitesi, Fen Edebiyat Fakültesi, Kimya Bölümü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2006

Tezin Dili: İngilizce

Öğrenci: IŞIL NARLI

Danışman: LEVENT KAMİL TOPPARE

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Tereftalik asit bis-(2-tiyofen-3-il-etil) ester (TATE) kullanılarak pirolle iletkenkopolimerler elde edildi. Bu elektrokimyasal kopolimerleştirme sırasında tirosinazenzimi bu matris içerisinde tutuklandı. Aktivite tayinleri, tirosinaz tarafındanoluşturulan kuinon molekülünün spektrofotometric analizini içeren Besthorn'sHydrazone metodu ile yapıldı. Enzim elektrotları, maksimum reaksiyon hızı (Vmax) veMichaelis-Menten sabiti bakımından karakterize edildi. Bunun yanı sıra, enzimelektrotlarının pH ve sıcaklık gibi çevresel etkenlere karşı kararlılığı araştırıldı.Kullanım kararlılıkları ve raf ömürleri tayin edildi.Şaraplar, özellikle de kırmızı şaraplar, çok sayıda biyolojik olarak etkin maddeiçerirler. Bunlardan en önemlisi polifenollerdir. Polifenollerin önemi güçlü antioksidanolma özelliklerinden kaynaklanır. Değişik markaların kırmızı şaraplarında fenolikmaddelerin miktarı oluşturulan enzim elektrotları kullanılarak tayin edildi. Kırmızışaraplarda bulunan çok sayıdaki inhibitörlerden dolayı, serbest halde enzim kullanılarakyapılan fenolik madde tayini gerçek değerleri yansıtamaz. Bu yüzden, tutuklanantirosinaz enziminin inhibisyona karşı tavrını anlayabilmek için, benzoik asit, sinnamikasit ve sorbik asit inhibitörleri kullanılarak aktivite tayini yapıldı.Anahtar Kelimeler: Elektrokimyasal polimerleşme, tirosinaz, enzim tutuklaması,inhibisyon, şarap