Akademik Veri Yönetim Sistemi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Orta Doğu Teknik Üniversitesi, Fen Edebiyat Fakültesi, Biyolojik Bilimler Bölümü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2002
Öğrenci: UFUK ÇELİKKOL
Danışman: HÜSEYİN AVNİ ÖKTEM
Özet:Bu çalışmada, partikül bambardımanı tekniğiyle mikroyaralamanın ve vakum infiltrasyonuna dayalı Agrobacterium aracılığıyla gen transferinin, mercimek kotiledon boğumu eksplantlarında geçici GUS geni ifadesi üzerindeki etkisi incelenmiştir. Kullanılan yöntemin farklılığının ayırt edilebilmesi için farklı suş/ikili plazmid çiftleriyle yapılan tüm deney setlerinde dört ayrı uygulama denenmiştir.Çalışma boyunca dört Agrobacterium suşunun, LBA4404, EHA105, C58C1, KYRT1 ve iki farklı ikili plazmid vektörünün, pGUSINT ve pTJK136, kotiledon boğumlarının geçici gen ifadelerinin yoğunluğu üzerindeki etkileri de incelenmiştir. Farklı suş/ikili vektör çiftlerinin kullanımıyla değişkenlik göstermekle birlikte, genel olarak mikroyaralamanın geçici GUS ifade yoğunluklarım azalttığı gözlemlenmiştir. Vakum infiltrasyonu da ifadelerde istatistiksel olarak (p»0.05) belirgin bir değişikliğe yol açmamıştır. Bunun üzerine kotiledon boğumunun iğne yardımıyla mekanik olarak yaralanmasının GUS ifadesi üzerindeki etkisi incelenmiştir. KYRTl:pTJK136 olarak tespit edilen en etkili suş/ikili vektör çiftinin seçimi ve mekanik yaralama yönteminin kullanımıyla, kotiledon boğumlarından, sabit GUS ifadesi gösteren, fakat kimerik yapıda filizler elde edilmiştir. Kotiledon boğumu eksplantlarının rejenerasyona çok uygun oluşu ve yukarıda belirtilen transformasyon yönteminin uygulanmasının, mercimekte transgenik bitki geliştirilmesi ihtimalini arttıracağı düşünülmektedir.