Effects of the plant phenolic quercetin on protein and mRNA expressions of xenobiotic metabolizing CYP1A1, CYP2E1, NQO1 and GST enzymes in colon cancer cell line sw620
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Orta Doğu Teknik Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Biyokimya Anabilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2015
Tezin Dili: İngilizce
Öğrenci: MELİHA ÜLGER
Danışman: ORHAN ADALI
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Kersetin çeşitli sağlık problemleri üzerindeki yaygın etkisi dolayısıyla yıllardır en çok çalışılan flavonoidlerden biridir ve etkili bir anti karsinojen bileşik olduğu bilinmektedir. Flavonoidlerin kanseri önleyebileceği veya tedavi edebileceği muhtemel mekanizmalarından biri faz I ve faz II enzim aktivitelerini düzenlemektir. Faz I enzimleri, ksenobiyotik bileşiklerin aktivasyon veya deaktivasyonundan sorumlu olan ksenobiyotik metabolize eden enzimlerdir ve sitokrom P450 enzimleri bu sınıfa dahildir. CYP1A1 ve CYP2E1 enzimleri kanser hücrelerinde aktif olarak bulunurlar ve karsinojenik bileşikleri modifiye ederler. Faz II enzimleri vücutta konjugasyondan sorumludurlar. GSTP1 ve NQO1 enzimleri faz II enzimlerinin önemli temsilcileridir ve görevleri, potansiyel karsinojenik metabolitlerin indirgenme ve konjugasyon reaksiyonları aracalığıyla eliminasyonudur. Bu çalışma kersetinin SW620 kolon karsinoma hücre hattında CYP1A1, CYP2E1, GSTP1 ve NQO1 enzimleri üzerine etkileri üzerine odaklanmıştır. Bu etkileri çalışabilmek için hücreler %5 CO2 içeren inkubatörde büyütülmüş ve akabinde 90 µM olarak bulunmuş olan IC50 değerine uygun olarak kersetinle muamele edilmiş ve bunu takiben kersetinin protein ve mRNA ekspresyonları üzerine etkileri sırasıyla Western Blot ve q-RT-PCR teknikleri ile analiz edilmiştir. Mevcut çalışmanın sonuçlarına göre, kersetin muamelesi CYP1A1 protein ekspresyonunda % 47 (p<0.01), CYP2E1 protein ekspresyonunda ise % 17 (p<0.01) azalmaya sebep olmuştur. Ayrıca, kersetin muamelesi sonucunda GAPDH mRNA sonuçları ile normalize edilmiş CYP1A1 mRNA ekspresyonu % 85 azalırken, CYP2E1 mRNA ekspresyonu da % 97 azalmıştır. Bunun yanı sıra, kersetin muamelesi sonucu GSTP1 protein ekspresyonu % 35 (p<0.001), NQO1 protein ekspresyonu da % 29 (p<0.001) azalma göstermiştir. Kersetin muamelesi, GSTP1 mRNA ekspresyonunu % 75 azaltırken (p<0.05) NQO1 mRNA ekspresyonunu da 1,6 kat artırmıştır (p<0.01). Sonuç olarak, mevcut çalışmanın sonuçları bitki fenoliği kersetinin ksenobiotik metabolize eden faz I ve faz II enzimleri CYP1A1, CYP2E1, GSTP1 ve NQO1 protein ve mRNA ekspresyonlarını etkileyerek kolon kanseri ilerleyişini düzenleyebileceğini göstermiştir.