Collagen matrices for guided tissue engineering
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Orta Doğu Teknik Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2003
Tezin Dili: İngilizce
Öğrenci: SUZAN BER
Danışman: VASIF NEJAT HASIRCI
Özet:Kollajen yaygın kullanılan bir biyomateryaldir. Bu çalışmada karodiimit (EDC) ve gluteraldeh.it çapraz bağlama, dehidrotermal (DHT) uygulama ve kalsiyum fosfat çöktürmesi gibi kollajeni daha kararlı hale getiren yöntemler kullanılmıştır. Çalışmada, kemik hücrelerinin üzerinde büyütüldüğü materyal yüzeylerinin topografısi ve kimyasal özelliklerinin hücre yönelimi üzerindeki etkisi araştırılmıştır. Mikrodesenli (çukur genişliği: 27 um, tepe genişliği: 2 um, çukur derinliği: 12 um) ve makrodesenli (çukur genişliği: 250 um, tepe genişliği: 100 um, çukur derinliği: 250 um) kollajen filmler kullanılarak desen boyutlarının kemik hücrelerinin dizilimi ve yönelimi üzerindeki önemi gösterilmiştir. Fibrinojen, hücre yönlendirilmesi için bir kimyasal yönlendirme aracı olarak kullanılmıştır. Kemik iliğinden izole edilmiş hücreler çoğaltılıp, çeşitli farklılaşma faktörler kullanılarak kemik hücresine dönüştürülmüştür. Kollajen filmlerin üzerindeki hücre üreme düzeyi MTS testi kullanılarak belirlenmiştir. Hücrelerin daha ziyade hidrofılik yüzeylere tutunduğu gözlenmiştir. Kalsiyum fosfat çöktürülmüş yüzeyler hidrofılik bir ortam sağlayarak etkin hücre üremesi göstermiştir. DHT ve EDC uygulanan yüzeyler daha hidrofobik olmakla birlikte hücre üremesini artırmaktadır. Gluteraldehit çapraz bağlama uygulanan yüzeylerde hücre üremesinin en az olduğu gözlenmiştir. Fakat bu yüzeylere fibrinojen tutturulduğunda hücre sayısının önemli ölçüde arttığı görlmüştür. Kemik hücresinin fenotip tayini ve yüzey topografisinin fenotip özelliklerine olan katkısı alkalin fosfataz enziminin (ALP) aktivitesinin ölçülmesiyle saptanmıştır. Fenotip özelliğinin kalsiyum fosfat çöktürülmüş yüzeylerde en yüksek olduğu görülmüş ve mineralizasyonun kemik fenotipini etkilediği ve indüklediği sonucuna varılmıştır. ALP akti vitesi 7. günden 14. güne kadar azalma göstermiştir. SEM ve floresan mikroskopisi sonuçlan kemik hücrelerinin desenli yüzeylerdeki dizilimlerini ve yönelimlerini göstermektedir. Yüzey topografisinin kemik oluşumunu engellemediği görülmüştür.Anahtar Kelimeler: Kemik doku mühendisliği, kemik hücresi fenotipi, kollajen, farklılaştırma yöntemleri, mikrodesen.