Extracellular protease activity of thermophilic bacteria isolated from Turkish soils and hot springs
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Orta Doğu Teknik Üniversitesi, Fen Edebiyat Fakültesi, Biyolojik Bilimler Bölümü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2000
Tezin Dili: İngilizce
Öğrenci: FATMA SEDA YÜCELER
Danışman: AYŞE GÜL GÖZEN
Özet:oz TÜRKİYE'NİN TOPRAK VE SICAK SU KAYNAKLARINDAN İZOLE EDİLMİŞ TERMOFİLİK BAKTERİLERİN HÜCRE DIŞI PROTEAZ AKTİVİTESİ YÜCELER FATMA SEDA Yüksek Lisans, Biyoloji Bölümü Tez Yöneticisi: Yard. Doç. Dr. Ayşegül OZAN Eylül, 2000, 77 sayfa Bu çalışma Türkiyenin toprak alanlarından ve sıcak su kaynaklarından önceden izole edilmiş termofilik bakterilerdeki toplam hücre dışı proteaz aktivitesinin incelenmesini içermektedir. Çalışmada enzim aktivitesinin araştırılabilmesi için onbir termofilik bakteri izolatı kullanılmıştır. Hücre dışı proteaz aktivitesinin tayininde kazein substrat olarak kullanılmıştır. Hücre dışı proteaz aktivitesi 280 nm'deki absorbans artışının sürekli gözlenmesiyle takip edilmiştir.Toplam proteazlar için pH ve sıcaklık optimaları belirlenmiştir ve pH optimizasyon çalışmaları 70°C'de yürütülmüştür. Hücre dışı proteazların izolatların biri için reaksiyon pH optiması 6, üçü için 7,beşi için 8, ikisi için 9olarak tesbit edilmiştir. Kültür süpernatanında bulunan onbir izolatın proteaz reaksiyonlarının optimum sıcaklıkları her bir izolat için bulunan optimum pH değerlerinde belirlenmiştir. Toplam hücre dışı proteaz aktivitesinin reaksiyon sıcaklık optiması onbir bakteriyel izolattan yedisi için 70°C, biri için 65°C ve üçü için 60°C olarak belirlenmiştir. Her bir izolat için bulunan optimum pH ve sıcaklık değerleri kullanılarak proteaz inhibitor kokteylinin toplam hücre dışı proteaz aktivitesi üzerindeki etkileri test edilmiştir. Onbir termofilik bakteri izolatı için toplam hücre dışı proteaz aktivitesinin inhibisyonunun, kullanılan proteaz inhibitörü miktarına bağlı olduğu gösterilmiştir. Depolama stabilitesi çalışmaları için dört izolat gelişigüzel seçilmiştir. Sonuçlar, kültür süpernatanlarının 24 saat oda sıcaklığında bekletilmesinin toplam hücre dışı proteaz aktivitesinin tesbit edilecek seviyede değişmesine yol açmadığını göstermiştir. Bu sonuca göre izolatların hücre dışı proteazları oldukça dayanıklıdır. Enzimlerin bu dayanıklılığı, deterjan katkı maddesi olarak ya da diğer endüstriyel işlemlerde kullanılabilmeleri için bir kriter oluşturmaktadır. Anahtar Kelimeler: Hücre dışı proteazlar, termofilik bakteri, kazein, pH optimizasyonu, sıcaklık optimizasyonu, proteaz inhibitörleri vı