Hybridoma development; monoclonal antibody production in search for protein purification

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Orta Doğu Teknik Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2002

Tezin Dili: İngilizce

Öğrenci: GÖZDE YÜCEL

Danışman: VASIF NEJAT HASIRCI

Özet:

oz HIBRIDOMA GELİŞİMİ; PROTEIN PÜRİFİKASYONU ARAŞTIRMASI İÇİN MONOKLONAL ANTİKOR ÜRETİMİ Yücel, Gözde Yüksek Lisans, Biyoloji Bölümü Tez Danışmanı: Prof. Dr. Gürdal Alaeddinoğlu Ortak Tez Danışmanı: Prof. Dr. Vasıf Hasırcı Ocak 2002, 81 sayfa Bu çalışmada, protein saflaştırılmasında kullanılmak üzere, hibridoma teknolojisi kullanılarak BSA ve katalaz enzimine karşı monoklonal antikor üretilmesi amaçlanmıştır. Antijenik enjeksiyon, her iki protein için de en iyi doz olarak 100 u.g olarak belirlendi ve immünizasyonlar, 2-3 hafta aralıklarla, 3 kez deri altı olarak gerçekleştirildi. Füzyon, son immünizasyonlar 3 veya 4 gün sonra yapıldı. Myeloma hücreleri, füzyondan bir hafta önce üretilmeye başlandı. Dalak- myeloma hibridlerini seçmek için HAT ve HT seçici besiyerleri kullanıldı. Pozitif kuyuları belirlemek için ELİSA yapıldı. Bulunan hibridlerin ön çoğaltma işlemi yapılarak sınırlayıcı dilüsyon ile ayrı klonları izole edildi. Klonlar arasından,yüksek antikor üreticileri için seçildi. BSA'ya karşı antikor üreten 7 adet ve katalaza karşı antikor üreten 8 adet hibrit ELISA ile belirlendi ve OD değerlerinin sırasıyla, 0.75 ve 0.883 arasında ve 0.675 ve 1.864 arasında değiştiği saptandı. Pozitif klonlar kullanılarak, monoklonal antikorların in vitro üretimi yapıldı ve antikor titreleri belirlendi. BSA monoklonal antikorları için titre 1/256 ve katalaz monoklonal antikorları için titre 1/64 bulundu. Anahtar kelimeler: Hibridoma teknolojisi, monoklonal antikorlar, BSA, katalaz