Glutathione S-Transferase theta 2-2: characterization in rat liver and determination in human breast tissues
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Orta Doğu Teknik Üniversitesi, Fen Edebiyat Fakültesi, Biyolojik Bilimler Bölümü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 1999
Tezin Dili: İngilizce
Öğrenci: Pınar Ergüney
Danışman: MESUDE İŞCAN
Özet:oz GLUTATYON S-TRANSFERAZ TETA2-2 : SIÇAN KARACİĞERİNDE KARAKTERİZE EDİLMESİ VE İNSAN MEME DOKULARINDA TAYİNİ Ergüney, Pmar Yüksek Lisans, Biyoloji Bölümü Tez Yöneticisi, Prof. Dr. Mesude İşcan Ocak, 1999, 77 Sayfa Glutatyon S-transferazlar (GST) (EC 2.5.1.18) elektrofilik madde ile glutatyonik konjugasyonunu katalize ederek detoksifikasyonunu sağlayan enzimlerdir. Memelilerde en az 4 farklı sitozolik GST ailesi vardır, Alfa, Mu, Pi ve Teta. Bugüne dek, sıçanda 3 teta isozim grubu - sGSTTl-1, sGSTT2-2 ve sGSTT3-3, insanda da iki çeşit teta isozimi - GSTT1-1 ve GSTT2-2, tespit edilmiştir. Bu çalışmada, sıçan karaciğerinde ve insan meme dokusunda GSTT2-2 enzimi menaftil sülfat sübstrat olarak kullamlarak incelenmiştir. Sıçan karaciğerinde, insan meme kontrol dokusunda ve insan meme tümör dokusunda bulunan ortalama GSTT2-2 aktiviteleri sırasıyla, 3.08 + 0.56 nmol/dak/mg, 6.26 ± 1.79 nmol/dak/mg and 8.72 ± 2.75 nmol/dak/mg'dır.Reaksiyon hızının 400^g proteine ve 15 dakika süresine kadar doğru orantılı olduğu gözlendi. Sıçan karaciğeri GSTT2-2 enzimi en yüksek aktiviteyi pH: S3 ve 37 °C'de. verdiği saptandı. GSTT2-2 0.5 mM menaftil sülfat ve 5 mM GSH konsantrayonlannda doygunluğa ulaştı. Sıçan karaciğerinde GSTT2-2'nin GSH için Vmax ve Km değerleri sırasıyla 2.7 nmol/dak/mg ve 1.00 mM olarak ve menaftil sülfat içinse 2.86 nmol/dak/mg ve 0.021 mM olarak hesaplandı. Sıçan karaciğerinde yapılan karakterizasyon çalışmaları sonucu elde edilen optimum şartlarda, 18 insan meme dokusunda GSTT2-2 aktivitesi incelendi. Menaftil sülfatın sübstrat olarak kullanıldığı bu ölçümlerde, tümörlü dokudaki GSTT2-2 enzim aktivitesinin kontrol dokudaki enzim aktivitesinden daha yüksek olduğu istatistiksel olarak saptandı. GSTTl-1 aktivitesi ile GSTT2-2 aktivitesi karşılaştırıldığında ise, aralarında bir korrelasyon olmadığı, yani biribirilerinden bağımsız oldukları tespit edildi. Anahtar sözcükler: Menaftil sülfat, glutatyon S-transferaz Teta (2-2), meme kanseri, isozim. vı