LIPOSOME-ENCAPSULATED PANOMYCOCIN: 
 PREPARATION, CHARACTERIZATION AND  
IN-VITRO DETERMINATION OF ANTIFUNGAL EFFICACY AGAINST VULVOVAGINAL CANDIDIASIS

GÜNCE BAYRAM

LIPOSOME-ENCAPSULATED PANOMYCOCIN: PREPARATION, CHARACTERIZATION AND IN-VITRO DETERMINATION OF ANTIFUNGAL EFFICACY AGAINST VULVOVAGINAL CANDIDIASIS

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Orta Doğu Teknik Üniversitesi, Fen Edebiyat Fakültesi, Biyolojik Bilimler Bölümü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2016

Tezin Dili: İngilizce

Öğrenci: GÜNCE BAYRAM

Danışman: KADRİ FATİH İZGÜ

Özet:

Vulvovajinal kandidiyazis, tüm kadınların %80'inden fazlasını yaşamları boyunca en az bir kez etkileyen ciddi bir maya enfeksiyonudur. Bu çalışmada, Pichia anomala NCYC 434 suşu tarafından üretilen ve vulvovajinal kandidiyazis enfeksiyonuna neden olan Candida türlerine karşı fungisidal etkisi gösterilmiş olan antimikotik/antifungal protein Panomycocin'in lipozomal liyofilize toz bir formulasyonu geliştirilmiştir. Bu çalışma kapsamında, vajinal epitelyumun yüzeyi ile aynı lipid kompozisyonunu içeren stratum korneum lipozomları hazırlanmış, Panomycocin bu lipozomlar içerisinde enkapsüle edilmiş, elde edilen formulasyonun karakterizasyonları ve in vitro insan vajinal epitelyum doku modelinde biyolojik aktivite testleri yapılmıştır. TEM (Geçirimli elektron mikroskobu) analizleri sonucunda lipozomların nano ölçekte ve düzgün morfolojide oldukları görülmüştür. Lipozom nanopartiküllerinin enkapsülasyon ve yükleme verimlilikleri, sırasıyla %73 ve %76.8 olarak bulunmuştur. Zeta potansiyel analizleri, lipozom nanopartikülleri yüzeyinde düzenli yük dağılımı olduğunu ve nanopartiküllerin koloidal sistemde stabil dağıldığını göstermiştir. FTIR (Fourier Dönüşümlü Kızılötesi Spektroskopisi) analizleri, lipozom nanopartikülleri ile enkapsüle edilmiş Panomycocin arasında herhangi bir kovalent etkileşim olmadığını göstermiştir. DLS (Dinamik Işık Saçılımı) analizleri ile nanopartiküllerin büyüklük açısıdan tek dağılımlı oldukları görülmüştür. XRD (X Işını Difraksiyonu) analizleri nanopartiküllerin amorf yapıda olduğunu göstermiştir. In vitro salım testleri, lipozomların solüsyon içerisinde 12 saat içinde taşıdıkları Panomycocin'in %1.71'ini saldıklarını; dolayısıyla sulu ortamda stabil bir lipozomal formulasyon hazırlanmış olduğunu göstermiştir. Hazırlanan lipozomal toz formulasyonun biyolojik aktivite testleri, 3 Candida albicans ve 1 Candida glabrata vajinal izolatı ile enfekte edilmiş in vitro insan vajinal epitelyum doku modelinde yapılmıştır. Stratum korneum lipidlerini içeren vajinal epitelyuma uygulanan yüklü lipozom nanopartikülleri, taşıdıkları tüm Panomycocin'i salmış ve bu testlerde saf Panomycocin'e uygun MFK değerleri (Candida albicans için 8ug/ml ve Candida glabrata için 2 ug/ml) elde edilmiştir. Bu çalışmada geliştirilen ve stratum korneum lipidleri kullanılarak hazırlanan lipozomal liyofilize toz formulasyonu sayesinde Panomycocin'in, vulvovajinal kandidiyazis tedavisinde kullanılabilmesi için ileri preklinik ve klinik çalışmalarının önü açılmıştır.