Marker gene transfer to opium poppy (Papaver somniferum L.)
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Orta Doğu Teknik Üniversitesi, Fen Edebiyat Fakültesi, Biyolojik Bilimler Bölümü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 1998
Tezin Dili: İngilizce
Öğrenci: UĞUR UZAY SEZEN
Danışman: SERTAÇ ÖNDE
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:öz HAŞHAŞA İŞARET GENİ TRANSFERİ (Papaver somniferum L.) SEZEN, Uğur Uzay Yüksek Lisans, Biyoloji Bölümü Tez Yöneticisi: Assoc. Prof. Sertaç önde Ortak Tez Yöneticisi: Prof. Dr. Zeki Kaya Aralık 1998, 67 sayfa Kültür haşhaşı'na (Papaver somniferum L.) Agrobacteıium tumefaciens yolu ile işaret geni olan neomisin fosfotransferaz'ın (NPTII) aktarılması ve transforme edilmiş dokuların tam bireyler haline organ oluşumu yoluyla dönüştürülmesi için gerekli yöntemler araştırıldı. Agrobacteıium ile ortak kültüre alınan haşhaş hipokotil parçalarına en verimli gen transferinin 19° C sıcaklıkta gerçekleştiği saptandı. Bu bulgu Agrobacteıium için T-DNA'nın aktarımının konjugasyon yolu ile gerçekleştiğine ilişkin öne sürülen hipotezi desteklemektedir. Transforme edilen bitki dokularının sürgün ve kök organ oluşum sıcaklığı ise 16 °C olarak belirlendi. Daha önce gerçekleştirilemeyen kök oluşumu için gereken uyarılma 0.01 mg.l"1 derişimindeki IBA ortamında başarı ile gerçekleştirildi. Tüm rejenerasyon işlemleri öldürücü Kanamisin seleksiyonu altında gerçekleştirildiğinden elde edilen bitkiciklerin gösterdiği bu Kanamisin direnci transgenik adaylığı için tek kanıt olarak kullanılmıştır.Buna karşın, transgenik adayı bitkiciklerin gerçekte transgenik olduklarının moleküller ispatı amacı ile gerçekleştirildiği PCR ve Southern Blot analizleri uzun süreli saklama işlemi sırasında genomik DNA örneklerinin ileri derecede parçalanması sonucu negatif sonucu vermiştir. Bu çalışmanın sonuçları haşhaşın genetik mühendisliği için gerekli alt yapıyı oluşturmaktadır. İşaret genlerinin aktarılmasında kullanılan yöntem, ileride tarım ilaçlarına, soğuğa ve hastalıklara dayanıklılık genlerinin haşhaşa aktarılması yolunda da izlenebilecektir. Anahtar Kelimeler: Papaver somniferum, gen aktarımı, Agrobacterium tumefaciens, ortak kültür, organ oluşumu, rejenerasyon. vı