Biyobozunur polimerik matriksler üzerinde kemik dokusu oluşumu


Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Orta Doğu Teknik Üniversitesi, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2002

Tezin Dili: İngilizce

Öğrenci: Gamze Torun Köse

Eş Danışman: FEZA KORKUSUZ, VASIF NEJAT HASIRCI

Özet:

Bu çalışmada, kalsiyum fosfat yüklü kollajen ve poli(hidroksibütirat- ko-hidroksivalerat) (PHBV8) matrikslerinde doku mühendisliği yöntemleri kullanarak kemik dokusu üretilmiştir. Sıçan kemik iliğinden izole edilen osteoblastlar ışık mikroskobu, alkalen fosfataz (ALP) aktivitesi, osteokalsin tayin deneyi ve integrin için uygulanan Western blot ile karakterize edilmiştir.sayılarının 37 °C de CO2 inkübatöründe ikiye katlanma süresi 50 + 2 saat olarak bulunmuştur. PHBV8 süngerlerinin hidrofilisite ve yüzey kimyasal özelliklerini değiştirmek ve osteoblastların tutunma düzeyini artırmak için de rf-oksijen plazması uygulanmıştır. Optimum güç ve zaman 100 W 10 dk olarak bulunmuştur. Başka bir taşıyıcı malzeme, lyofîlize kollajen, kemik kimyasal yapısını taklit edebilmek ve bu yolla daha iyi hücre artışı sağlayabilmek ve ayrıca matriks malzemesinin hızlı resorpsiyonunu önleyebilmek için kalsiyum fosfat yüklenmiştir. Kalsiyum fosfatın varlığı ve kalsiyumun fosfora molar oram (2.26) SEM-EDS ile saptanmıştır. PHBV8 ve kollajen matrikslerinin yüzey özellikleri, ortalama gözenek boyutları ve dağılımları, SEM ve SCION görüntü analizi programı ile incelenmiştir. Hazırlama koşullarına bağlı olarak matrikslerdeki boşlukların hacmi ve yoğunlukları da bulunmuştur. PHBVnin sıvı ortamdaki kararlılığı da incelenmiştir. 120 gün boyunca ağırlık ve yoğunluk değişmemiş ancak çalışmanın geri kalan kısmında oldukça belirgin bir düşme gözlenmiştir. Film ve matrikslerdeki hücre yoğunluğunun belirlenmesi için MTS testi kullanılmıştır. Matrikslerin içindeki osteoblast gelişimi ALP, osteokalsin testi, integrin için uygulanan Western blot, histolojik deneyler, SEM ve konfokal mikroskop ile belirlenmiştir. 29 gün inkübasyondan sonra matrikslerde osteoblastların büyüdüğü ve mineralizasyonun başladığı görülmüştür. Büyük boyutlu sükroz (300-500 um) ile yüklü, 100 W 10 dakika rf-plazmayla etkileştirilmiş PHBV8'in (6%, w/w) osteoblast büyümesi için en uygun matriks olduğu görülmüştür.